Маҳсулот

Таҳлили нави хроматографияи моеъи баландсифат барои гликосилтрансферазаҳо дар асоси ҳосилшавӣ бо кислотаи антранилӣ ва муайянкунии флуоресцент.

Таҳлилҳо бо истифода аз химияи беназири тамғагузории кислотаи 2-аминобензой (2AA; кислотаи антранилӣ, АА) барои чен кардани фаъолияти ҳам β1-4 галактозилтрансфераза (GalT-1) ва α2-6 сиалилтрансфераза (ST-6) бо моеъи баландсифат таҳия карда шуданд. Хроматография (HPLC) бо муайянкунии флуоресцентӣ (Anumula KR. 2006. Пешрафтҳо дар усулҳои ҳосилшавии флуоресцентӣ барои таҳлили хроматографии моеъи баландсифати карбогидратҳои гликопротеин. Анал Биохим. 350: 1-23).N-Acetylglucosamine (GlcNAc) ва N-acetylactosamin ба сифати аксепторҳо ва uridindiphosphate (UDP)-galactose ва citidine monophosphate (CMP)-N-acetylneuraminic acid (NANA) ҳамчун донор барои GalT-1 ва ST-6 мутаносибан истифода шуданд.Маҳсулоти ферментативӣ дар ҷои худ бо АА нишонгузорӣ карда шуданд ва аз субстратҳо дар сутуни TSKgel Amide 80 бо истифода аз шароити фазаҳои муқаррарӣ ҷудо карда шуданд.Воҳидҳои ферментҳо аз минтақаҳои авҷ тавассути муқоиса бо стандартҳои ҳамзамон ҳосилшуда Gal-β1-4GlcNAc ва NANA-α2-6 Gal-β1-4GlcNAc муайян карда шуданд.Хатӣ (консентратсияи вақт ва фермент), дақиқӣ (дар дохили ва байнитаҳлил) ва такроршавандагӣ барои таҳлилҳо муқаррар карда шуданд.Муайян карда шуд, ки таҳлилҳо дар мониторинги фаъолияти ферментҳо ҳангоми ҷудокунӣ ва тозакунӣ муфиданд.Санҷишҳо хеле ҳассос буданд ва ба андозагирии анъанавии радиоактивӣ дар асоси шакар баробар ё беҳтар иҷро шуданд.Формати таҳлилро инчунин барои чен кардани фаъолияти трансферазаҳои дигар истифода бурдан мумкин аст, ба шарте ки аксепторҳои карбогидрат барои тамғагузорӣ нуги коҳишдиҳанда дошта бошанд.Таҳлил барои аксепторҳои гликопротеин бо истифода аз IgG таҳия карда шуд.Усули кӯтоҳи профили HPLC барои ҷудо кардани гликанҳои IgG (биантеннарии G0, G1, G2, моно- ва дисалилшуда) таҳия карда шуд, ки ба зудӣ муайян кардани фаъолияти GalT-1 ва ST-6 мусоидат кард.Ғайр аз он, ин усули профилсозӣ бояд барои мониторинги тағирот дар гликанҳои IgG дар муҳити клиникӣ муфид бошад.