Маҳсулот

Таҳлили рӯйдодҳои фосфоризатсия дар саросари протеом то ҳол мушкилоти асосии таҳлилӣ аст, зеро мураккабии зиёди шабакаҳои фосфоризатсияи сафедаҳо.Дар ин кор, мо мукаммалии Lys-N, Lys-C ва трипсинро дар робита ба қобилияти онҳо барои саҳмгузорӣ дар таҳлили глобалии фосфопротеом арзёбӣ мекунем.Нусхаи тозашудаи мубодилаи катионҳои қавии рН паст барои самаранок ҷудо кардани пептидҳои N-терминал ацетилизатсияшуда, фосфорилшуда ва тағирёфта истифода шудааст.Ҳамагӣ 5036 фосфопептидҳои зиёдатнашавандаро метавон бо суръати кашфи бардурӯғи <1% аз 1 мг сафеда бо истифода аз омезиши се фермент муайян кард.Маълумоти мо нишон дод, ки такрори байни маҷмӯи додаҳои фосфопептидҳои бо протеазҳои гуногун тавлидшуда ночиз буд, дар ҳоле ки такрори байни ду маҷмӯи додаҳои триптии ба ин монанд тавлидшуда ҳадди аққал 4 маротиба зиёдтар аст.Бо ин роҳ, истифодаи мувозии Lys-N ва трипсин имкон дод, ки шумораи фосфопептидҳои ошкоршуда дар муқоиса бо танҳо трипсин 72% афзоиш ёбад, дар ҳоле ки таҷрибаи такрории трипсин танҳо 25% афзоиш ёфт.Ҳамин тариқ, ҳангоми тамаркуз танҳо ба маълумоти трипсин ва Lys-N, мо 4671 фосфопептидҳои зиёдатиро муайян кардем.Таҳлили минбаъдаи сайтҳои ошкоршуда нишон дод, ки маҷмӯи маълумотҳои Lys-N ва трипсин бо мотивҳои ба таври назаррас фарқкунандаи фосфоризатсия ғанӣ гардонида шудаанд, ки минбаъд нишон медиҳанд, ки равишҳои мултипротеаз дар таҳлилҳои фосфопротеом хеле арзишманданд.