Маҳсулот

Тарзи якҷоя кардани таъсири мутатсияҳои ҳамзамон барои тағир додани фаъолияти ферментӣ ба осонӣ пешгӯӣ карда намешавад, зеро ин таъсирот на ҳамеша ба таври хаттӣ илова карда мешаванд.Аз ин рӯ, тавсифи таъсири мутатсияҳои ҳамзамон боқимондаҳои аминокислотаҳо, ки субстратро мепайвандад, метавонад дар фаҳмидани хусусияти субстратҳои ферментҳо саҳми назаррас гузорад.Дар бета-гликозидаза аз Spodoptera frugiperda (Sfbetagly), ҳарду пасмондаҳои Q39 ва E451 бо субстрат мутақобила мекунанд ва ин барои муайян кардани хосияти субстрат муҳим аст.Мутантҳои дукаратаи Сфбетагли (A451E39, S451E39 ва S451N39) бо роҳи мутагенези ба макон нигаронидашуда омода карда шуданд, ки дар бактерияҳо ифода карда шуданд ва бо истифода аз хроматографияи наздикӣ тоза карда шуданд.Ин ферментҳо бо истифода аз п-нитрофенил бета-галактозид ва п-нитрофенил бета-фукозид ҳамчун субстрат тавсиф карда шуданд.Таносуби k cat/Km барои мутантҳои якка ва дукаратаи Сфбетагли, ки дорои мутатсияҳои ба макон равонашуда дар мавқеъҳои Q39 ва E451 истифода шудааст, барои нишон додани он, ки таъсир ба энергияи озоди ханҷари ESduble (комплекси ҳолати гузариши фермент) мутацияҳои дукарата (Gdouble) истифода шудааст. daggerxy) маҷмӯи таъсирҳое нест, ки дар натиҷаи мутатсияҳои ягона ба вуҷуд меоянд (Gdouble daggerx ва Gdouble daggery).Ин фарқият дар ханҷари Gdouble нишон медиҳад, ки таъсири мутатсияҳои ягона қисман ба ҳам мепайвандад.Аз ин рӯ, ин таъсири умумӣ танҳо як маротиба дар Gdouble daggerxy ҳисоб карда мешавад.Маълумоти кристаллографӣ дар бораи бета-гликозидазаҳо мавҷудияти пайванди гидрогении бидентатиро бо боқимондаҳои Q39 ва E451 ва як гурӯҳи гидроксилҳои субстрат нишон медиҳанд.Аз ин рӯ, ҳам маълумотҳои термодинамикӣ ва ҳам кристаллографӣ нишон медиҳанд, ки боқимондаҳои Q39 ва E451 ба таъсири мутақобилаи онҳо бо субстрат таъсири мутақобила доранд.