Маҳсулот

LecA (PA-IL) як лектин ва адгезини ситотоксикӣ мебошад, ки аз ҷониби Pseudomonas aeruginosa истеҳсол мешавад, ки галактозидҳои гидрофобиро бо хосият ва наздикии баланд мепайвандад.Бо истифода аз синтези тарҷумаи lecA-egfp ва таҳлили иммуноблоти матритсаи берун аз ҳуҷайравии биофилм, мо нишон медиҳем, ки lecA дар ҳуҷайраҳои биофилм парвариш карда мешавад.Дар таҳлилҳои статикии биофилм дар ҳам полистирол ва ҳам аз пӯлоди зангногир, умқи биофилм ва фарогирии сатҳи рӯи он бо мутатсияи lecA коҳиш ёфт ва дар штамми аз ҳад зиёд истеҳсолкунандаи LecA PAO-P47 афзоиш ёфт.Фарогирии сатҳи биофилм аз ҷониби штамми волидайн, PAO-P47, аммо на мутант lecA дар купонҳои пӯлод низ тавассути афзоиш дар ҳузури изопропил-бета-D-тиогалактозид (IPTG) ё p-нитрофенил-алфа-D-галактозид ( NPG).Ғайр аз он, биофилмҳои баркамол ваҳшӣ, ки дар сурати набудани ин галактозидҳои гидрофобӣ ба вуҷуд омадаанд, метавонанд тавассути илова кардани IPTG пароканда карда шаванд.Баръакс, илова кардани p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF), ки ба лексияҳои P.aeruginosa LecB (PA-IIL) наздикии баланд дорад, ба ташаккул ё парокандашавии биофилм таъсире надошт.Рушди планктонии P. aeruginosa PAO1 аз мавҷудияти IPTG, NPG ё NPF бетаъсир набуд ва инчунин штамм қодир набуд, ки ин қандҳоро ҳамчун манбаи карбон истифода барад ва аз он шаҳодат медиҳад, ки таъсири мушоҳидашуда ба ташаккули биофилм аз сабаби ҷилавгирӣ аз рақобатпазирии LecA-лиганд буд. ҳатмӣ.Натиҷаҳои шабеҳ инчунин барои биофилмҳои дар шароити ҷараёни динамикӣ дар купонҳои пӯлод парваришшуда ба даст оварда шуданд, ки нишон медиҳанд, ки LecA дар шароити гуногуни муҳити зист ба меъмории биофилми P. aeruginosa саҳм мегузорад.

Дар баргҳои растаниҳои арабидопсис як алфа-L-фукосидаза (EC 3.2.1.51) кашф шудааст, ки қодир аст боқимондаи т-фукосилро аз занҷири паҳлӯии олигосахаридҳои ксилоглюкан озод кунад.Ғайр аз он, як алфа-L-фукосидаза бо хосияти якхелаи субстрат аз баргҳои карам (Brassica oleracea) тоза карда шуд, то як банд дар SDS-PAGE эҷод кунад.Аз ин банди сафеда ду пайдарпаии пептидҳо ба даст оварда шуданд ва онҳо барои муайян кардани як гени Арабидопсис барои алфа-фукосидаза, ки мо пешниҳод мекунем, онро AtFXG1 номидан истифода бурданд.Илова бар ин, як гени Arabidopsis бо гомология бо альфа-L-фукосидазҳои маълум низ пайдо шудааст ва мо пешниҳод кардем, ки онро AtFUC1 номгузорӣ кунем.Ҳарду AtFXG1 ва ATFUC1 ба таври гетерологӣ дар ҳуҷайраҳои Pichia pastoris ва фаъолиятҳои алфа-L-фукосидаза, ки ба муҳити фарҳанг ҷудо карда шудаанд, ифода карда шуданд.Алфа-L-фукосидаза, ки аз ҷониби AtFXG1 рамзгузорӣ шудааст, бар зидди олигосахаридҳои ксилоглюкан XXFG ва инчунин бар зидди 2'-фукозил-лактитол фаъол буд, аммо на бар зидди p-нитрофенил-алфа-L-фукопиранозид.Аммо, AtFUC1 ба таври гетерологӣ ифодашуда танҳо бар зидди 2'-фукозил-лактитол фаъол буд.Ҳамин тариқ, якум бояд бо мубодилаи ксилоглюкан алоқаманд бошад.