Маҳсулот

Ба монанди дигар вирусҳои риштаи мусбати РНК, томбусвирусҳо бо комплекси репликазаи вирусии бо мембрана алоқаманд (VRC) такрор мешаванд.VRC аз p92, ки ба вируси РНК вобаста аст, полимеразаи РНК (RdRp), чаперонеи вирусии p33 РНК ва якчанд сафедаҳои муштараки мизбон иборат аст.Барои он ки RdRp-и функсионалӣ пас аз тарҷумаи он табдил ёбад, протеини такрории p92 бояд ба VRC ворид карда шавад ва пас аз он фаъол карда шавад.Мо қаблан дар як таҳлили иқтибос аз хамиртуруши бе ҳуҷайра нишон дода будем, ки фаъолсозии вируси stunt-и помидор (TBSV) RdRp омил(ҳо)-и ҳалшавандаро талаб мекунад.Дар ин мақола, мо протеини зарбаи гармии ҳуҷайравии 70 (Hsp70) -ро ҳамчун омили интихобшудаи мизбон барои фаъолсозии рекомбинантии N-терминалӣ буридашудаи TBSV RdRp муайян мекунем.Илова бар ин, бастани молекулаи хурди функсияи Hsp70 синтези РНК-ро тавассути томбусвируси RdRp in vitro бозмедорад.Ғайр аз он, мо нишон медиҳем, ки фосфолипидҳои бетараф, яъне фосфатидилетаноламин (PE) ва фосфатидилхолин (PC) фаъолсозии RdRp-ро дар vitro тақвият медиҳанд.Баръакси ин, фосфатидилглицерин (PG) дар фаъолсозии in vitro RdRp таъсири қавӣ ва бартаридоштаро нишон медиҳад.Мо инчунин нишон медиҳем, ки PE ва PC ҳамкории RdRp-вируси плюс-қатори РНК [(+) РНК] -ро ҳавасманд мекунанд, дар ҳоле ки PG пайвастшавии РНК-и вирусиро ба RdRp бозмедорад.Дар асоси нақшҳои ҳавасмандкунанда ва ингибитории фосфолипидҳои гуногун дар фаъолсозии tombusvirus RdRp, мо пешниҳод мекунем, ки таркиби липидҳои мембранаҳои зериҳуҷайраи мақсаднок аз ҷониби томбусвирусҳо барои танзими маҷмӯи нави VRC дар ҷараёни сироят истифода мешаванд. (RdRp), ки барои синтез кардани насли РНК вирусӣ дар ҳуҷайраҳои сироятшудаи якчанд вирусҳои РНК-и мусбат масъул аст, дар аввал ғайрифаъол аст.Ин стратегия эҳтимол дорад, ки синтези РНК-и вирусиро дар ситозол пешгирӣ кунад, ки зуд ба индуксияи аксуламалҳои антивирусии ҳуҷайравии бо РНК оварда мерасонад.Ҳангоми ҷамъшавии комплекси репликазаи бо мембрана алоқаманд, RdRp вирусӣ тавассути раванди нопурра даркшуда фаъол мешавад, ки RdRp-ро қобилияти синтези РНК мекунад.Бо истифода аз TBSV RdRp, мо нишон медиҳем, ки шаперони ҳуҷайравии Hsp70 ва фосфолипидҳои нейтралӣ ба фаъолсозии RdRp дар vitro мусоидат мекунанд.Баръакси ин, фосфатидилглицерол (PG) ба фаъолсозии RdRp дар in vitro ва таъсири мутақобилаи RdRp-вируси РНК таъсири бартаридошта дорад ва аз он шаҳодат медиҳад, ки микродомени мембранаӣ дар атрофи RdRp ба қобилияти он барои синтези РНК таъсири калон мерасонад.Ҳамин тариқ, фаъолсозии вируси RdRp эҳтимол аз ҷузъҳои сершумори мизбон дар ҳуҷайраҳои сироятшуда вобаста аст.